Hill-Plot, graphische Auftragung zur Bestimmung des Kooperativitätsgrades von Enzymen (Kooperativität). Die Auftragung logY_S/(1 – Y_S) gegen logα liefert eine Kurve, deren Steigung 1 ist für großes und kleines α und endliche Wechselwirkungsenergie zwischen den substratbindenden Orten. Dabei ist Y_S die Sättigungsfunktion, das ist der Bruchteil des Enzyms in der Enzym-Substrat-Komplex-Form, und α = S/K_m. Für die meist im Experiment realisierten Zwischenwerte von α erhält man näherungsweise eine Gerade mit der maximalen Steigung h (Abb.), dem Hill-Koeffizienten. Dieser dient als Maß für die Kooperativität und ist im Allgemeinen nicht identisch mit der Zahl n der Untereinheiten eines Enzyms, sondern nur eine minimale Schätzung für n. Im Fall unendlicher Wechselwirkungsenergie zwischen den substratbindenden Orten entartet die Hill-Kurve in eine Gerade, deren Steigung gleich der Anzahl der Untereinheiten ist. Die in der Abb. gezeigte Konstruktion des Ordinatenstücks AB erlaubt die Bestimmung der totalen Wechselwirkungsenergie ΔG_W zwischen substrat- oder effektorbindenden Orten:
ΔG_W= 2,303·RT·AB. Hierbei ist Rdie allgemeine Gaskonstante und T die absolute Temperatur. Die Sättigungsfunktion kann auch für Effektoren ermittelt werden. Y_E ist der Bruchteil des Enzyms in der Enzym-Effektor-Komplex-Form. Für Enzyme, die mit ihrem Enzymsubstratkomplex im Gleichgewicht stehen, kann die Sättigungsfunktion Y_S durch die kinetische Sättigung v/V_m ersetzt werden, so dass logv·(V_m – v) gegen logα aufgetragen werden kann. Für einen Effektor muss entsprechend log(v – v₀₎/(V – v) gegen logα aufgetragen werden. Es bedeutet v die gemessene Reaktionsgeschwindigkeit bei konstantem S, v₀ die Geschwindigkeit ohne Effektor bei gleichem S und V die Geschwindigkeit bei Sättigung mit dem Effektor für das gewählte S; S ist die Substratkonzentration.

Hill-Plot