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Lexikon der Biochemie: isoelektrische Fokussierung

isoelektrische Fokussierung, die Trennung von Proteinen aufgrund ihrer unterschiedlichen isoelektrischen Punkte in einem pH-Gradienten durch Elektrophorese. Der Gradient wird bei diesem Säulenverfahren durch ein Gemisch synthetischer niedermolekularer Trägerampholyte (Ampholine) mit unterschiedlichem pI während der Elektrophorese ausgebildet und durch einen Rohrzuckergradienten stabilisiert. Die zu trennenden Proteine wandern dann während der Elektrophorese an diejenige Stelle in der Säule, die ihrem pI-Wert entspricht, und können nach Stromabschaltung durch vorsichtiges Leeren der Säule direkt und in präparativen Mengen gewonnen werden.

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