Kompaktlexikon der Biologie: Two-Hybrid System
Two-Hybrid System, yeast two-hybrid system, ein experimentelles Verfahren zum Nachweis von Protein-Protein-Interaktionen in vivo, d.h. innerhalb lebender Hefezellen. Es können z.B. zwei bekannte Proteine dahingegend untersucht werden, ob sie miteinander interagieren. Die Bez. beruht auf der Tatsache, dass Transkriptionsfaktoren aus einer DNA-bindenden Domäne und einer aktivierenden Domäne bestehen. Diese werden voneinander getrennt und mit jeweils einem der zu untersuchenden Proteine fusioniert; die Herstellung dieser Fusionsproteine erfolgt unter Verwendung besonderer Klonierungsvektoren. Kommt es zu Wechselwirkungen zwischen den Proteinen, werden die beiden Transkriptionsfaktor-Domänen in unmittelbare Nachbarschaft gebracht und können dann ein in bestimmten Hefestämmen vorhandenes Reportergen aktivieren. In ähnlicher Weise kann das T. -H. S. auch dazu verwendet werden, mit einem bestimmten Protein als „Köder“ (engl. bait) in einer speziell konstruierten Genbank potenzielle, bislang noch unbekannte Interaktionspartner nachzuweisen.
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