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Lexikon der Biologie: Plasmid-Amplifikation

Plasmid-Amplifikationw [von Plasmide, latein. amplificatio = Erweiterung], ein auch als Chloramphenicol-Stimulation bezeichnetes Verfahren zur Erhöhung der Ausbeute bei der präparativen Isolierung von Plasmid-DNA aus Bakterien. Hierbei wird für eine kurze Zeit (ca. 20–40 min) dem Medium, in dem die plasmidtragenden Bakterien wachsen, das Antibiotikum Chloramphenicol zugesetzt, das durch Bindung an die Ribosomen die Proteinbiosynthese und die mit dieser gekoppelte Replikation der genomischen DNA in den Bakterienzellen hemmt. Eine große Anzahl von Plasmiden („amplifizierbare Plasmide“) ist jedoch nicht an die Proteinsynthese der Zellen gekoppelt und benötigt nur vorhandene bakterielle DNA-Polymerase I (DNA-Polymerasen) für ihre Replikation. Die Zahl der Plasmide innerhalb der Zellen kann sich somit, bei gleichzeitigem „Stillstand“ anderer zellulärer Prozesse, erhöhen und bis zu einem Drittel der gesamten Menge an zellulärer DNA ausmachen.

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