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Lexikon der Biologie: Turbidimetrie

Turbidimetriew [von *turb- , griech. metrein = messen], immunologische Methode, bei der die Konzentration eines Proteins durch Messung der Abschwächung der Lichtintensität bestimmt werden kann ( vgl. Abb. ). Die Turbidimetrie ist eine weniger empfindliche Methode als die Laser-Nephelometrie. Die zu untersuchende Probe wird mit einer spezifischen Antikörperlösung (Antikörper im Überschuß, eventuell Zusatz eines Akzelerators zur Beschleunigung der Reaktion) inkubiert, wodurch es zur Ausbildung von Antigen-Antikörper-Komplexen (Immunkomplex, Antigen-Antikörper-Reaktion) und damit zu einer Trübung des Testansatzes kommt. Die Turbidimetrie wird als Endpunktverfahren (optischer Test), fixed-time-Methode (Messung zu 2 definierten Zeitpunkten und Bestimmung der Extinktionsdifferenz; Extinktion, Photometrie) oder kinetische Methode durchgeführt. Die Auswertung erfolgt über eine Eichkurve (Eichgerade), die mit Hilfe von Referenzstandards erstellt wurde.



Turbidimetrie

Das in der Turbidimetrie verwendete Meßgerät wird als Turbidimeter bezeichnet. Die Abb. stellt eine schematische Darstellung eines solchen Geräts dar. Als Strahlungsquelle (Sq) dienen Xenon-Lampen oder Laser. Durch eine optische Vorrichtung (O Optik, B Blende) und ein Interferenzfilter (F/M Filter oder Monochromator) wird ein Lichtstrahl mit einer bestimmten Wellenlänge erzeugt, der über Quarz-Lichtleiter (Ql) zum einen zu einem Detektor der Referenzeinrichtung (Se Strahlungsempfänger), zum anderen auf die Küvette (K), welche die Analysenlösung enthält, geleitet wird. Durch Verwendung eines Lichtleiters wird über Vielfach-Totalreflexion eine sehr gute Strahlhomogenität erreicht (die Lichtintensität ist gleichmäßig über den Strahlquerschnitt verteilt). Durch diese Vielfach-Totalreflexion kommt es jedoch zu einer Strahldivergenz, die durch eine nachgestellte Sammellinse (O) verringert wird. Zur Parallelisierung der Lichtstrahlen ist noch eine weitere bikonvexe Linse (O) notwendig. Diese optischen Einrichtungen vor der Küvette gewährleisten, daß ein umgrenztes Lichtbündel, bestehend aus parallelen Lichtstrahlen (Primärstrahl), auf die Meßlösung fällt. Durch die sich in Lösung befindenden Antigen-Antikörper-Komplexe wird das Licht gestreut. Das nicht gestreute und das vorwärts gestreute Licht werden durch einen Detektor (Se Strahlungsempfänger) aufgefangen und nach dem photometrischen Prinzip (bei 334 nm oder 340 nm Wellenlänge) analysiert (G Galvanometer mit Meßwertanzeige). Das Meßsignal entspricht dem Verhältnis der Intensitäten des eingestrahlten und des an der Photozelle ankommenden Lichts.

Copyright 1999 Spektrum Akademischer Verlag, Heidelberg
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