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Lexikon der Biologie: Auflichtmikroskopie

Auflichtmikroskopie w,mikroskopisches Verfahren (Mikroskop), bei dem sich Beleuchtungslichtquelle und die Nachweisoptik bezüglich des Präparats auf derselben Seite befinden. Mit der Auflichtmikroskopie wird die Oberfläche undurchsichtiger (opaker) Körper untersucht. Das Licht wird durch halbdurchlässige Spiegel oder Prismen, die sich zwischen Objektiv und Okular befinden oder mit dem Objektiv verbunden sind, seitlich auf das zu untersuchende Objekt gelenkt. Das Licht wird dann vom Objekt reflektiert oder gebeugt. Wie bei der Durchlichtmikroskopie, unterscheidet man auch bei der Auflichtmikroskopie zwischen Hellfeld- und Dunkelfeldbeleuchtung ( vgl. Abb. ). Die richtige Wahl aus der Vielzahl von Beleuchtungsmöglichkeiten hängt vom Präparat selbst ab. Undurchsichtige, unregelmäßig geformte Präparate werden vor allem im schrägen Auflicht (Dunkelfeld) betrachtet, ebenso kontrastarme filigrane Strukturen, die sich kaum vom Umfeld abheben. Sehr kontrastreiche, stark zerklüftete Objekte ergeben in einer steilen Ring-Auflichtbeleuchtung tageslichtähnliche, schatten- und reflexfreie Abbildungen. Glatte, ebene, reflektierende und polierte Oberflächen wie z. B. Metallschliffe werden am besten mit einer vertikalen Auflichtbeleuchtung beobachtet. Doppelbrechende kristalline Präparate werden üblicherweise im polarisierten Auflicht untersucht. Weil sich mit der Auflichtmikroskopie nur die Oberfläche von Objekten, aber nicht deren innerer Aufbau untersuchen läßt, hat sie in Biologie und Medizin im allgemeinen nur geringe Bedeutung. Eine wichtige Ausnahme stellt die zunehmend an Bedeutung gewinnende Auflichtfluoreszenzmikroskopie dar (Fluoreszenzmikroskopie).




Auflichtmikroskopie

Prinzip der Hellfeld- und Dunkelfeldbeleuchtung bei der Auflichtmikroskopie
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